Die Hauptgeräte der instrumentellen Ausstattung sind Transmissions-Elektronen-Mikroskope (TEM), ein Philips CM12 der Fa. FEI Electron Optics, Eindhoven, Niederlande (früher: Philips Electron Optics), sowie ein Zeiss 902. Weiterhin ist ein Raster-Elektronen-Mikroskop Zeiss/LEO 1530 mit FEG und EDX vorhanden.
Die Merkmale und Ausstattung des CM12:
-
maximale Beschleunigungsspannung: 120 keV, LaB6-Kathode;
- euzentrische Präparat-Kippung für Stereo-Bilder und Kippserien (Kristallographie; Tomographie), Objektraum-Kühlung, Philips-'Kryo-Blades', Kryo-Halter (T=-170°C; Modell 626 der Fa. Gatan, München), und Hochkipp-Kalter (-80 bis +80 Grad; Eigenbau der mechan. Werkstatt des MPI für Biochemie, Abt. molekulare Strukturbiologie, Martinsried);
- eine TV-rate CCD-Kamera Model 673 (Fa. Gatan, München) zur schnellen Durchsicht und Beurteilung der Präparate bei niedriger Vergrößerung und Schnellfokussierung der Objektivlinse;
- eine Slow-scan-CCD-Kamera (Modell 0124, Fa. TVIPS Tietz GmbH, Gauting) zur digitalen Bilderfassung mit niedrigster Dosis mit angeschlossenem Steuerrechner; die Kamera dient zum Aufnehmen hochauflösender Bilder (1024 x 1024 Bildpunkte); auf dem Steuerrechner ist ein umfangreiches Software-Paket vorhanden, u.a. mit Fourierspectrum und Autofocus, zum Erstellen größerer Bilder durch Montagen, zum Ausmessen von Präparat-Details, zur sofortigen Dokumentation (Laserdrucker), sowie zur Steuerung vieler Mikroskop-Funktionen einschließlich Justierung.
Die Ausstattung des Labors umfasst darüber hinaus:
- eine Hochdruck-Gefriereinreichtung (Leica EM-PACT2 mit RTS, Rapid Transfer System)
- eine Hochvakuumanlage zum Gefrierbrechen, Gefrierätzen und Schwermetall-Bedampfen (CFE 50 der Fa. Cressington Ltd, Watford, England), mit drei Elektronenstrahl-Verdampfern: Platin/Kohle 15 Grad; Platin/Kohle 45 Grad, Kohle 90 Grad, Präparatkühlung, freie Wahl der Präparat-Temperatur zwischen -180° und +25°C; der Präparattisch ist sowohl kühlbar als auch kontinuierlich um 360 Grad drehbar (Rotationsbedampfung);
- eine Anlage zur Herstellung dünner Kohlefilme, die dann auf die Kupfer-Netzchen aufgebracht werden und den eigentlichen Objektträger für die Präparate darstellen (Fa. Edwards, Typ 306);
- eine Gefriersubstitutions-Anlage: Leica EM-AFS2. Dieses Gerät dient der schonenden Entwässerung durch Gefriersubstitution biologischer Proben bei -90°/-60°/-30°C, einschließlich UV-Polymerisation der Harze.
- Einbetten in Kunstharze (Epon, LR White/Gold; Lowicryl)
- Ultramikrotome (Leica) zur Erstellung von Ultra- und Semidünnschnitten (Dicke: ca. 50 – 500 nm) von in Kunstharz eingebetteten Proben;
- Immunmarkierung an Ultradünnschnitten oder Gefrierbruch-Replikas
- Darstellung von Viren, 2D-Proteinkristallen, Protein-(DNA)-komplexen durch Negativ-Kontrastierung (Uranylacetat, Phosphorwolframat)
- Digitale Bildanalyse: Korrelationsmittelung, Einzelpartikel-Mittelung, Klassifizierung, 3D-Rekonstruktion von 2D-Kristallen, Tomographie; Grafik-PC zur 3D-Rekonstruktion (IMOD; Univ. of Boulder, CO, USA), und zur Visualisierung von 3D-Datensätzen mit AMIRA (Visage Imaging)
Darüber hinaus sind vorhanden:
- ein 'Kryo-Jet' zum schnellen Einfrieren ('Vitrifizieren') extrem dünner Präparate (JFD 30 der Fa. Bal-Tec); maximale Präparat-Dicke: ca 5 – 20 µm, zwischen zwei Kupferplättchen.
Zusammenarbeiten:
Mikrobiologie, Dr. Harald Huber (Ultrastruktur und Zell-Zell-Interaktion hyperthermophiler Archaeen);
Mikrobiologie, Prof. Dr. Reinhard Wirth (Adhäsion von Mikroorganismen an Oberflächen; Flagellen und Pili);
Institut für Anatomie, Prof. Dr. R. Witzgall (Ultrastruktur der Nieren von knock-out Mäusen);
Institut für Physiologie, Prof. Dr. A. Kurtz / Prof. Dr. C. Wagner (Ultrastruktur von Nierenzellen);
Institut für Biochemie, Prof. Dr. H. Tschochner (DNA-Protein Komplexe);
Institut für Zoologie, Prof. Dr. J. Heinze und Prof. Dr. S. Schneuwly (Ultrastruktur von Insekten-Augen u. -Gehirnen);
Institut für Physikal. u. Theoret. Chemie, Prof. Dr. W. Kunz (Struktur von Biomorphen);
Institut für Pharmazie, Pharmazeut. Technol., Prof. Dr. A. Göpferich (Struktur von Nanopartikeln).
|
